GLP-1受体激动剂（GLP-1 RA）已成为代谢疾病领域的重磅产品。全球已有超十款药物上市，国内超50家企业竞相布局。其研发价值远不止于血糖控制，凭借降糖、减重及心血管保护等多重卓越功效，正不断开辟非酒精性脂肪肝（NASH）、阿尔茨海默病等全新适应症，开启巨大的市场增长空间。点击链接回顾GLP-1 RA研发进展及新适应症MED临床医学 | GLP-1 RA跃居糖尿病一线用药，新适应症空间广阔
本期介绍美莱德GLP-1 RA一站式研发服务（二）——人血清中抗体（ADA）检测方法学建立。美莱德生物分析中心实验室建立了ELISA法检测人血清中抗GLP-1 RA抗体的方法，按照国家药品监督管理局药品审评中心2021年第25号《药物免疫原性研究技术指导原则》以及FDA等监管机构颁发的相关法规或指导原则进行了方法学验证，对方法学的阈值确定、灵敏度、滴度试验、Hook效应、精密度、药物耐受、选择性&特异性、稳健性、样本稳定性、SS-中间工作液稳定性、相似性评价等指标进行了全方位的验证。
采用酶联免疫吸附测定法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）评估人血清中的抗GLP-1 RA抗体免疫原性（ADA结合抗体）。其原理是将GLP-1 RA对照品预先包被在微孔板上，封闭液封闭后制成固相抗原，加入待测样本温育后样本中的抗GLP-1 RA抗体（ADA）与预先包被GLP-1 RA结合，洗板后再加入提前配制好的检测抗体工作液，最后加入TMB产生显色反应并使用终止液（2M H2SO4）终止反应，使用酶标仪450nm波长读取微孔板各孔吸光度值（OD值），OD值与样品中GLP-1 RA抗体（ADA）的量呈正相关。
实验室采用抗GLP-1 RA多克隆抗体为阳性参照，用于配制分析批质控、验证样本等，阴性质控采用经正规临床试验采集的空白基质，同时针对三期临床试验也专门采集了相关患者基质开展验证。实验室按照指导原则对验证项目进行方法学指标考察，方法验证结果见表1：
有文献表明，GLP-1 RA抗药抗体发生率、滴度及发生时间等均在可控范围内，不会对药效和安全性有太大的影响，但建立一套足够灵敏、稳定的检测方法依然是十分重要的。本次建立的GLP-1 RA抗体（ADA）检测方法完成全部方法学验证，其精密度、稳健性、选择性、特异性、钩状效应、药物耐受、相似性评价等指标均满足检测需求且高于相关指导原则要求，表明该方法适用于人血清中抗GLP-1 RA抗体（ADA）的测定。
依据及参考文献：
国家药品监督管理局药品审评中心2021年第25号《药物免疫原性研究技术指导原则》。
[1] NAUCK M A，PETRIE J R，SESTI G，et al. The once ‐ weekly human GLP ‐ 1 analogue semaglutide provides significant reduc‐ tions in HbA1c and body weight in patients with type 2 diabe‐ tes. Abstracts of the 48th EASD Annual Meeting of the European Association for the Study of Diabetes［J］Diabetologia，2012，55（S1）：531‐538.
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中国生物制品学杂志2024年7月第37卷第7期 Chin J Biologicals July 2024，Vol. 37 No. 7
